研究黄芩苷对狼疮鼠肾炎的治疗作用和对滤泡辅助T(Tfh)细胞的调控作用。
方法8只12周龄雌性狼疮鼠按随机数字表法随机分为两组,每组4只。黄芩苷组腹腔注射200 mg/kg黄芩苷每日1次,共治疗4周,对照组注射生理氯化钠溶液。治疗结束时,考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白含量,处死小鼠,取出脾脏称重,分离单个核细胞,流式细胞仪检测Tfh细胞比例;取出肾脏行苏木精-伊红染色,评估肾脏损伤情况。从上述对照组狼疮鼠脾脏中分离单个核细胞,免疫磁珠分选幼稚性CD4+ T细胞,分3组培养,空白对照组不做处理,诱导组加入10 μg/L IL-21、IL-6和3 μg/L抗CD3及CD28抗体培养5 d,干预组在诱导组基础上同时加入40 μmol/L黄芩苷体外培养5 d。用50 μg/L佛波酯、750 μg/L离子霉素和20 mg/L布雷非德菌素A刺激在上述体系中培养的部分幼稚CD4+ T细胞5 h。流式细胞仪检测CD4+CXCR5+PD-1+细胞和CD4+IL-21+细胞比例。采用SPSS20.0进行统计分析,定量资料通过方差分析和Student t检验进行组间比较。
结果黄芩苷治疗能有效改善狼疮鼠肾脏损伤,黄芩苷组尿蛋白含量(1 416 ± 171)μg/24 h显著低于对照组[(2 623 ± 278)μg/24 h,P = 0.022],脾脏中Tfh细胞的比例也低于对照组(12.6% ± 2.3%比40.2% ± 1.1%,P = 0.005)。体外黄芩苷能抑制Tfh细胞分化,干预组CD4+CXCR5+PD-1+Tfh细胞比例(13.3% ± 0.8%)低于诱导组(17.6% ± 0.9%,P = 0.04),CD4+IL-21+细胞比例(1.0% ± 0.4%)亦低于诱导组(2.7% ± 0.2%,P < 0.01)。
结论黄芩苷治疗能有效改善狼疮肾炎的损伤,可能与抑制Tfh细胞分化有关。