【摘 要】
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根据枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BJ3-2的精氨酸脱羧酶(ADC)的编码基因spe A序列设计特异性酶切引物,克隆基因speA序列。测序结果显示,基因speA全长为1473 bp,编码490个
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31260394/C200207)
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根据枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BJ3-2的精氨酸脱羧酶(ADC)的编码基因spe A序列设计特异性酶切引物,克隆基因speA序列。测序结果显示,基因speA全长为1473 bp,编码490个氨基酸,分子质量为58 ku。基因spe A克隆至原核表达载体,获得重组菌pET28a-spe A/BL21,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,1.0 mmol/L的异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)28℃诱导4 h,上清液和菌体均能表达出ADC蛋白,上清液经纯化、透析、冷冻干燥可获得纯度97%的ADC酶,酶联免疫吸附检测(ELISA)ADC酶活为16780 U/mg。为speA基因的表达、纯化及酶学性质研究奠定了理论基础。
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