【摘 要】
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本研究旨在探究Cdh1对胎盘滋养干细胞分化过程细胞周期的影响及其机制.构建Cdh1-/-的模型小鼠并分离培养Ts细胞,通过MTT和流式细胞术的方法研究Cdh1-/-对未分化Ts细胞增殖和
【机 构】
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吉林大学中日联谊医院,长春,130033;苏州大学附属第二医院,苏州,215004;东莞康华医院,东莞,523000
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本研究旨在探究Cdh1对胎盘滋养干细胞分化过程细胞周期的影响及其机制.构建Cdh1-/-的模型小鼠并分离培养Ts细胞,通过MTT和流式细胞术的方法研究Cdh1-/-对未分化Ts细胞增殖和细胞周期的影响,通过相差显微镜观察Cdh1-/-对Ts细胞形态的影响,并且通过对磷酸化组蛋白H3的抗体进行免疫染色以及MTT的方法研究Cdh1-/-对Ts细胞有丝分裂和分化后Ts细胞增殖的影响,最后用Western blotting和RT-PCR的方法探索Cdh1对有丝分裂细胞周期蛋白以及胎盘滋养干细胞分化相关基因表达的调控.结果 显示,成功分离培养Ts细胞,Cdh1-/-能够促进未分化Ts细胞的增殖并且使G2/M期细胞比例增加,Cdh1-/-能够使Ts细胞持续进行有丝分裂并促进分化后Ts细胞继续增殖,Cdh1能够使细胞周期蛋白cyclinB表达增加,P27蛋白有所减少并且能够影响多个胎盘滋养干细胞分化相关基因表达.Cdh1能够通过调控有丝分裂细胞周期蛋白的表达影响分化过程中的胎盘滋养干细胞的细胞周期,使其维持在有丝分裂持续增殖,并且Cdh1能够调控多个胎盘滋养干细胞分化相关基因表达影响干细胞分化,因此Cdh1在有丝分裂/核内周期转换以及胎盘滋养干细胞分化中起重要调节作用.
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