【摘 要】
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目的 建立猪肝细胞与骨髓间充质干细胞(MSCs)体外共培养体系,为生物人工肝的构建提供理想细胞来源.方法 自中华实验猪(n=3)髂前七棘抽取骨髓,采用密度梯度离心法分离单个核细
【机 构】
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南京医科大学鼓楼临床医学院肝胆外科,南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科
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目的 建立猪肝细胞与骨髓间充质干细胞(MSCs)体外共培养体系,为生物人工肝的构建提供理想细胞来源.方法 自中华实验猪(n=3)髂前七棘抽取骨髓,采用密度梯度离心法分离单个核细胞,贴壁传代培养至第3代;原位两步胶原酶法分离猪肝细胞后与MSCs随机混合培养,观察共培养肝细胞形态和功能的变化水平.结果 第3代MSCs纯度>90%,肝细胞活率>95%,纯度>99%.共培养组肝细胞迅速黏附于MSCs表面,在三维空间呈球形聚集生长.异质细胞间出现细胞连接,超微结构与正常肝细胞接近.共培养组肝细胞白蛋白分泌水平和尿素合成能力自第1天培养起均显著高于对照组(P
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