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目的
通过溴脱氧核苷尿嘧啶-酶联免疫吸附测定(BrdU-ELISA)局部淋巴结实验,评价3,4-双(4’-氨基呋咱基-3’)氧化呋咱(DATF)对小鼠皮肤的致敏性。
方法选择SPF级BALB/C小鼠30只,随机分为5组,即高、中、低剂量DATF组、阳性对照组和溶剂对照组,每组6只。高、中、低剂量DATF组分别给予50%、25%、10%(0.50、0.25、0.10 g/ml)的DATF溶液,阳性对照组给予1% 2,4-二硝基氯苯(DNCB)溶液,溶剂对照组给予丙酮/橄榄油(4∶1)。给药结束后,取耳后淋巴结并制备细胞悬液;采用ELISA法检测BrdU掺入测定细胞增殖水平,计算BrdU标记指数(LI)和刺激指数(SI)为1.6时的受试物浓度(EC1.6)。
结果各组小鼠耳廓厚度差异无统计学意义(P>0.05),DATF无皮肤刺激性;与溶剂对照组比较,高剂量DATF组和阳性对照组小鼠淋巴结重量明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与溶剂对照组比较,其他各组BrdU LI明显增大,差异均有统计学意义(P<0.01);低、中、高剂量DATF组SI分别为6.1、8.8、12.1,DATF的EC1.6为2.2%,可确定DATF为极强致敏物质。
结论根据经济合作与发展组织第442 B项(OECD TG 442 B)实验指导原则判定,DATF对小鼠皮肤具有极强的致敏性。