探讨CD137-CD137配体（CD137L）信号通路是否通过c-Jun氨基末端激酶（JNK）途径影响小鼠血管平滑肌细胞（VSMC）自噬。
方法采用组织块贴壁法进行C57BL/6J小鼠胸主动脉VSMC原代培养，取分离培养的第3~5代VSMC进行实验。实验分为4组，即对照组、CD137激动组[加入CD137L重组蛋白（终浓度10 μg/ml）]、JNK抑制组[予JNK抑制剂SP600125（DMSO溶解，终浓度10 μmol/L）预处理细胞30 min，然后再加入CD137L重组蛋白（终浓度10 μg/ml）]和DMSO组[加入与JNK抑制组等量二甲基亚砜（DMSO）预处理30 min，然后加入CD137L重组蛋白（终浓度10 μg/ml）]。Western blot法检测各组VSMC磷酸化JNK（p-JNK）、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）及p62蛋白的表达水平。自噬双标腺病毒（mRFP-GFP-LC3）荧光显微镜观察各组VSMC自噬流变化。透射电镜观察各组VSMC内自噬小体及自噬溶酶体变化。
结果（1）各组VSMC p-JNK、LC3Ⅱ和p62蛋白表达水平：CD137激动组VSMC p-JNK、LC3Ⅱ和p62蛋白表达水平均明显高于对照组（分别为1.15±0.19比0.72±0.21、1.03±0.13比0.59±0.15、1.10±0.19比0.76±0.15，P均<0.05）。JNK抑制组p-JNK、LC3Ⅱ和p62蛋白表达水平均低于CD137激动组（分别为0.61±0.21比1.15±0.19、0.74±0.11比1.03±0.13、0.21±0.12比1.10±0.19，P均<0.05）。DMSO组p-JNK、LC3Ⅱ和p62蛋白表达水平与CD137激动组比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。（2）各组VSMC自噬流：CD137激动组VSMC内荧光斑点总数和黄色荧光点数均多于对照组[分别为（93.00±14.11）个/细胞比（52.33±9.61）个/细胞和（64.33±6.81）个/细胞比（25.67±3.51）个/细胞，P均<0.05]，且CD137激动组VSMC内黄色荧光斑点数多于红色[分别为（64.33±6.81）、（28.67±7.51）个/细胞]。而JNK抑制组VSMC内光斑点总数和黄色荧光点数均少于CD137激动组[分别为（53.00±3.17）个/细胞比（93.00±14.11）个/细胞、（15.33±4.51）个/细胞比（64.33±6.81）个/细胞，P均<0.05]，JNK抑制组VSMC内红色荧光斑点数多于黄色[分别为（37.67±4.73）、（15.33±4.51）个/细胞]。DMSO组荧光斑点总数和黄色荧光点数与CD137激动组比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。（3）各组VSMC自噬小体及自噬溶酶体：CD137激动组VSMC内自噬小体和自噬溶酶体总数多于对照组[（17.67±6.03）个/细胞比（5.67±2.52）个/细胞，P<0.05]，且自噬小体的水平较高、自噬溶酶体的水平较低。JNK抑制组VSMC内自噬小体和自噬溶酶体总数少于CD137激动组[（5.67±4.04）个/细胞比（17.67±6.03）个/细胞，P<0.05]，且自噬溶酶体的水平较高、自噬小体的水平较低。DMSO组VSMC内自噬小体和自噬溶酶体总数与CD137激动组比较，差异无统计学意义（P>0.05），且均为自噬小体的水平较高、自噬溶酶体的水平较低。
结论CD137-CD137L信号通路可能通过JNK途径影响小鼠VSMC自噬。