【摘 要】
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目的从弓形虫RH株总DNA中克隆棒状体蛋白ROP2基因片段,克隆至表达载体pET22b中,导入大肠杆菌中表达.方法采用半巢式PCR扩增法从基因组DNA中扩增编码ROP2基因片段,克隆至质粒p
【机 构】
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温州医学院微生物免疫学教研室,苏州大学基础医学院,复旦大学生命科学院生化与分子生物学实验室
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目的从弓形虫RH株总DNA中克隆棒状体蛋白ROP2基因片段,克隆至表达载体pET22b中,导入大肠杆菌中表达.方法采用半巢式PCR扩增法从基因组DNA中扩增编码ROP2基因片段,克隆至质粒pUC119中,经PCR和酶切鉴定后,进行DNA序列测定,并以SacⅠ/HindⅢ双酶切克隆至表达载体pET22b上,重组质粒pET22b-ROP2转化大肠杆菌BL21-Codon Plus (DE3)-RIL菌株中,经IPTG诱导表达.结果从弓形虫RH株总DNA中扩增到1.0kb的ROP2基因片段,构建成功重组质粒pU
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