论文部分内容阅读
目的 建立利用RNAi技术抑制Ku80表达的HeLa细胞模型,探讨Ku80在放射生物学方面的功能.方法 构建靶向抑制Ku80的siRNA表达质粒,转染HeLa细胞,筛选稳定表达的转化克隆;Western blotting检测Ku80表达变化;6 MV X线照射6 Gy后,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;克隆形成实验检测细胞SF2、D0等值.结果 构建的质粒转染HeLa细胞获得3个稳定转染克隆,Western blotting分析表明2个阳性克隆Ku80蛋白抑制率分别达到89.3%和96.4%;Ku80表达抑制细胞受X线照射后48及72 h的凋亡率高于对照细胞(P＜0.05),但4株细胞的细胞周期变化无统计学意义(P＞0.05);2个阳性克隆细胞株的D0和SF2值明显降低,在D10剂量时的增敏比分别为1.315和1.365.结论 运用RNAi技术建立的Ku80表达抑制克隆细胞可以成为简单实用的细胞模型;Ku80-siRNA可以抑制Ku80的表达,从而促进HeLa细胞对X线的敏感性。