多黏菌素抗性基因mcr-4/5/8实时荧光定量PCR检测方法的建立

来源 :中国兽医杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jinwei001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
多黏菌素是治疗多重革兰阴性耐药菌最重要的药物之一,近年来,其耐药性逐年持续上升。多黏菌素耐药基因mcr可以通过质粒传播,对人类健康和畜牧业生产造成了严重的威胁。本试验根据GenBank下载的多黏菌素耐药基因mcr-4、mcr-5和mcr-8的基因参考序列,设计特异性引物并验证其特异性,用SYBR Green I染料法建立实时荧光定量检测方法。将mcr-4、mcr-5和mcr-8基因克隆到pMD19-T载体上,构建标准质粒,再以标准质粒为模板建立荧光定量PCR反应的扩增曲线、标准曲线和熔解曲线。结果发现,扩
其他文献
【摘 要】在初中体育教学中积极推进体育活动是一项值得的举措,教师应充分发挥其优势,以引导学生掌握营养知识、形成良好品格和培养其团队意识,最终促进学生的身心健康成长。本文分析初中体育教学现状概述,并阐述体育活动促进初中生健康成长。  【关键词】体育活动;初中;健康成长  当前的体育教学不再仅是注重体育知识的授受和学生体育技能的培养,而是更注重学生的个性发展。因此,如何突破传统体育教学中时间与空间的制
期刊
【摘 要】武术健身操是近几年兴起的针对学生身体健康而创立的锻炼形式,它的有效开展可以提高学生各个方面的素质,对我国现代教育的发展具有良好的推动作用。通过对山西应用科技学院武术健身操的开展现状进行调查研究和分析,找出武术健身操在高校开展的影响因素并进行分析,希望武术健身操在以后的发展中路越来越广,对学生全面发展的影响越来越突出。  【关键词】高校;武术健身操;开展;影响因素  一、前言  武术健身操
期刊
为了快速发现细胞培养过程中的支原体污染,并在污染发生早期有效去除,从而挽救细胞。以吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞为研究对象,通过显微镜直接观察法、DNA荧光染色法结合检测细胞,可在1 h内快速发现细胞是否存在支原体污染。对疑似支原体污染的试验组细胞使用25μg/mL支原体抗生素(Plasmocin)连续处理14 d,再通过上述2种方法和PCR法结合检测细胞中是否仍存在支原体污染,绘制药物处理后试验组细胞的生长曲线。结果表明,支原体污染早期,用25μg/mL Plasmocin连续处理试验组细胞14 d后,高倍显
Label-free定性技术是基于质谱分析蛋白质组学的研究方法,适用于样品量小或样品稀缺物种的蛋白质组学研究。为了筛选猪囊尾蚴病的特异性抗原诊断标识,首先利用高效液相色谱-串联质谱系统对虫体和患者血清进行全蛋白定性分析,然后筛选囊虫的外分泌蛋白。结果表明,人感染猪囊虫后,囊虫的外分泌蛋白刺激宿主机体产生免疫应答,参与寄生虫逃避宿主的免疫机制。为探究囊虫外分泌蛋白在免疫逃避机制中的意义,通过基因本体论(GO)、直系同源簇(COG)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集等分析猪源囊虫和患者血清蛋白质组学,
本研究以鸡传染性支气管炎病毒(IBV)标准毒株M41为原料,通过SPF鸡胚尿囊腔繁殖、外源病毒检测、灭活、冻干和分装,添加适量的稳定剂和保护剂,最终成功制备鸡传染性支气管炎病毒核酸检测专用标准物质。采用荧光定量RT-PCR方法,由9家权威实验室进行合作定值,确定标准物质的定性检测结果和参考值。结果显示:所研制的标准物质纯净,均匀性和稳定性良好,定性准确,易保存,可常规运输,安全,无生物传染风险;标准物质在-20℃、4℃、25℃、37℃环境下可分别稳定保存12个月以上、60 d、7 d、3 d;合作定值验证