糖巨肽对新生大鼠坏死性小肠结肠炎肠组织损伤及肠上皮细胞凋亡的影响

来源 :中华儿科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:juejiang12
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目的

建立新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型,探讨糖巨肽对NEC新生大鼠肠道的保护作用。

方法

36只SD新生大鼠采用抽签法随机分为NEC模型组、糖巨肰干预组和正常对照组,每组12只。大鼠出生后第1~3天均为母乳喂养;在第4~6天,正常对照组继续母乳喂养,而NEC模型组和糖巨肽干预组则通过人工喂养+缺氧复氧冷刺激的方法进行造模。第6天喂养结束后三组大鼠均置于保育箱中空腹24 h,然后用颈椎脱臼法处死大鼠,取回盲部近段回肠组织进行固定、切片,行病理检查、TUNEL凋亡检测和电镜检查;同时取回盲部附近肠段制备组织匀浆,检测肠组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)的含量,并采用荧光定量PCR的方法检测PAF mRNA的表达。

结果

(1)病理评分:NEC模型组为(2.17±0.83)分,糖巨肽干预组(0.92±0.79)分,正常对照组(0.17±0.39)分,糖巨肽干预组与NEC模型组比较,差异有统计学意义(H=8.819, P=0.003);(2)肠组织TNF-α水平:模型组(41.94±13.51)pg/ml,干预组(31.69±11.68)pg/ml,正常组(17.42±7.18)pg/ml,干预组与模型组相比,差异有统计学意义(F=3.959,P=0.030);(3)肠组织IL-1β水平:模型组(150.33±36.41)pg/ml,干预组(118.36±33.00)pg/ml,正常组(28.44±15.04)pg/ml,干预组与模型组相比,差异有统计学意义(F=5.080,P=0.013);(4)肠组织PAF mRNA表达水平(2-ΔΔCt值):模型组为(3.01±0.96),干预组为(1.56±0.29),正常组为(1.01±0.13),干预组与模型组比较,差异有统计学意义(F=25.251,P=0.000);(5)电镜观察:正常对照组可见其细胞核占细胞体积的大部分,结构清晰,有核膜包被,提示正常细胞相;NEC模型组可见凋亡小体,提示凋亡晚期相;糖巨肽干预组可见染色质靠核膜边集,核孔扩大,提示凋亡早期相;(6)TUNEL检测肠上皮细胞凋亡率:NEC模型组为(38.79±9.79),糖巨肽干预组为(29.54±7.30),正常对照组相为(6.37±1.96),糖巨肽干预组肠上皮细胞凋亡率低于NEC模型组,两组比较,差异具有统计学意义(F=6.888,P=0.003)。

结论

在人工喂养条件下,缺氧、复氧和冷刺激方法的NEC造模成功率为75%(9/12)。糖巨肽对NEC新生大鼠肠道具有保护作用。

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