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选取云南黑松露为研究对象,对黑松露多糖优化提取工艺,纯化后单糖组成和体外抗氧化活性进行研究.应用响应曲面法优化后最佳提取工艺条件为:提取温度75.36℃,提取时间1.02 h与料液比1:31.32 g/mL,在此条件下,多糖的实验得率为11.79%,预测得率为11.86%.采用DEAE-Sepharose快速流动柱从黑松露粗多糖中分离纯化出4个新的多糖组分(TSP-1、TSP-2、TSP-3、TSP-4).应用离子色谱法分析多糖成分,得出TSP-1的单糖组成为盐酸氨基半乳糖、葡萄糖和甘露糖,比例为2.8:77.1:20;TSP-2为鼠李糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖,比例为18.7:1.5:2:40.6:37.3;TSP-3为鼠李糖、盐酸氨基葡萄糖、葡萄糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和半乳糖的比例为13:3.5:58.4:21.1:2.7:1.2.粗多糖(crud TSP)和TSP-1、TSP-2、TSP-3三个纯化组分多糖浓度在0.25~4 mg/mL范围内,对DPPH自由基的最大清除率分别为73.93%、36.67%、73.60%和54.10%;对ABTS自由基的最大清除率分别为60.47%、36.20%、41.87%和52.73%;金属螯合力分别为61.63%、27.00%、52.50%和43.17%;还原力吸光度值分别为0.39、0.34、0.28和0.56.该研究旨在为研究黑松露多糖具生物活性的物质基础及开发利用提供理论依据,并对其保健食品研发具有重要意义.