【摘 要】
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目的:探讨miRNA-132通过Wnt/β-catenin信号通路促进牙周膜干细胞的成骨分化。方法:细胞培养,观察牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)形态。成骨诱导,检测成骨样分化情况。成脂诱导,检测成脂分化情况。将PDLSCs细胞分为3组,分别为对照组、miRNA-132模拟组和miRNA-132抑制剂组,采用八肽胆囊收缩素(Cholecy
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目的:探讨miRNA-132通过Wnt/β-catenin信号通路促进牙周膜干细胞的成骨分化。方法:细胞培养,观察牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)形态。成骨诱导,检测成骨样分化情况。成脂诱导,检测成脂分化情况。将PDLSCs细胞分为3组,分别为对照组、miRNA-132模拟组和miRNA-132抑制剂组,采用八肽胆囊收缩素(Cholecystokinin octapeptide,CCK-8)检测PDLSCs细胞增殖,酶联免疫检测碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase protein,ALP)活性,茜素红染色检测矿化结节沉积,采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)法检测成骨相关基因,采用Western blot检测Wnt/β-catenin相关通路蛋白。结果:miRNA-132模拟组的PDLSCs细胞增殖能力、ALP活性及矿化结节数量显著高于对照组,miRNA-132抑制剂组明显低于对照组和miRNA-132模拟组,差异有统计学意义(P<0.05)。miRNA-132模拟组中的ALP、Runx2、OCN和Osterix mRNA的相对表达明显高于对照组,miRNA-132抑制剂组显著低于对照组和miRNA-132模拟组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-132模拟组中的GSK3β和β-catenin蛋白的表达明显高于对照组,miRNA-132抑制剂组明显低于对照组和miRNA-132模拟组,差异有统计学意义(P<0.05)。XAV-939组中的ALP、Runx2、OCN和Osterix mRNA的相对表达明显低于对照组,miRNA-132模拟组表达高于对照组和XAV-939组,miRNA-132模拟组+XAV-939组表达高于XAV-939组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:过表达miRNA-132可以促进牙周膜干细胞的成骨分化,抑制miRNA-132表达从而抑制了人牙周膜干细胞的成骨分化,miRNA-132调节牙周膜干细胞的成骨分化,其机制可能是通过Wnt/β-catenin信号通路来实现的。
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