【摘 要】
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目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白质5A (NS5A)对Hepcidin基因表达的影响. 方法 用含HCV NS5A基因的表达质粒pcNS5A瞬时转染QSG7701细胞,采用逆转录-聚合酶链反应及Wes
【机 构】
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中南大学肝病研究所中南大学湘雅二医院感染科
【基金项目】
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国家自然科学基金;国家十一五传染病重大专项
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目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白质5A (NS5A)对Hepcidin基因表达的影响. 方法 用含HCV NS5A基因的表达质粒pcNS5A瞬时转染QSG7701细胞,采用逆转录-聚合酶链反应及Western blot试验观察HCV NS5A和Hepcidin的mRNA转录水平及蛋白质表达水平,铁染色后观察细胞内铁储留情况.检测数据的多组间比较行单因素方差分析,两两比较行LSD-t检验.结果 转染pcNS5A质粒细胞内有HCV NS5A的mRNA和蛋白的表达,未转染质粒组和转染空白质粒pRc/CMV组细胞内无HCV NS5A的mRNA和蛋白的表达.未转染质粒组、转染pRc/CMV质粒组和转染pcNS5A质粒组细胞的Hepcidin mRNA相对表达量分别为0.711±0.049、0.718±0.052和0.264±0.030,转染pcNS5A组Hepcidin mRNA表达低于未转染质粒组和转染pRc/CMV质粒组(t值分别为- 13.523和- 13.045,P值均＜0.01).转染pcNS5A质粒组细胞Hepcidin蛋白表达较未转染质粒组及转染pRc/CMV质粒组下降,且随着转染pcNS5A质粒剂量的增加,Hepcidin蛋白表达下降更明显.铁染色结果显示,转染pcNS5A质粒细胞内铁较转染pRC/CMV质粒细胞和未转染质粒细胞高.结论 HCV NS5A蛋白能抑制Hepidin的mRNA和蛋白质表达,并引起细胞内铁的储留增加.
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