木瓜三萜抗吲哚美辛诱导RGM-1细胞凋亡的作用

来源 :中华中医药学会中药实验药理分会第十二次学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cwwei1
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  目的:木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai 的干燥近成熟果实,以“百益之果”著称,具有舒筋活络、和胃化湿的功效,用于湿痹拘挛、腰膝关节酸重疼痛、暑湿吐泻、转筋挛痛、脚气水肿等的治疗.尽管当前国内外对木瓜的抗炎药理活性有广泛的研究报道,但鲜见有对消化系统相关的研究报道.本人前期研究发现其重要活性成分木瓜三萜显示出了较好的胃粘膜保护作用,为阐释皱皮木瓜既具有抗炎作用,又具有抗胃溃疡作用提供了依据,但具体机制仍有待进一步阐明.基于此本实验利用吲哚美辛诱导RGM-1细胞损伤模型,探讨木瓜三萜对吲哚美辛诱导RGM-1 细胞损伤的影响,探讨其可能的作用机制.方法:用吲哚美辛诱导RGM-1 细胞建立细胞损伤模型,MTT 法检测不同浓度木瓜三萜对RGM-1 细胞增殖、流式细胞术和Hoechst33258 染色分析木瓜三萜对吲哚美辛诱导细胞凋亡的影响,JC-1 染色法测定细胞线粒体跨膜电位水平,Caspase 试剂盒检测RGM-1 细胞中Caspase-9 和Caspase-3 的活性,Real-time PCR 检测RGM-1 细胞中TFF1、p53、Bcl-2 及BaxmRNA 表达,Western blot 检测RGM-1 细胞中TFF1 和p53 蛋白表达.结果:当木瓜三萜浓度低于100μg/mL 时,木瓜三萜对RGM-1 细胞的生长无明显的影响;当木瓜三萜浓度低于50μg/mL 时,木瓜三萜与吲哚美辛联用对RGM-1 细胞的生长有促进作用;木瓜三萜可显著增加吲哚美辛诱导RGM-1 细胞损伤的活性(P<0.05,P<0.01),升高线粒体膜电位,抑制细胞凋亡和改善细胞形态,上调TFF1 蛋白表达及TFF1、Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2 与Bax 的比值,下调p53 蛋白表达及p53 和Bax mRNA 表达,降低Caspase-9及Caspase-3 活性(P<0.05,P<0.01).结论:木瓜三萜对吲哚美辛诱导RGM-1 细胞损伤的保护作用与其抑制RGM-1 细胞凋亡有关,其作用机可能与上调TFF1、Bcl-2 表达,下调p53、Bax、Caspase-3、Caspase-9 表达有关.本研究为木瓜中的主要活性组分木瓜三萜用于NSAIDs 的防治及具有抗炎同时又具有胃粘膜保护作用的新型抗炎药物的研发提供基础药理学依据.
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