【摘 要】
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目的探讨脑出血后凝血酶诱导的自噬细胞类型。方法建立凝血酶脑损伤模型,大鼠脑内基底节注射凝血酶,收集脑损伤标本,免疫荧光双染检测beclin1~+与神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP~
【基金项目】
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国家自然科学基金资助课题(编号:81501007,81272374)
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目的探讨脑出血后凝血酶诱导的自噬细胞类型。方法建立凝血酶脑损伤模型,大鼠脑内基底节注射凝血酶,收集脑损伤标本,免疫荧光双染检测beclin1~+与神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP~+)以及神经元特异性烯醇化酶(NSE~+)的重合率;电镜下直接观察含有自噬泡的细胞。分别培养星形细胞和神经细胞,经凝血酶处理后,用Western blot法测量微管相关蛋白轻链3 (LC3)Ⅰ型向Ⅱ型转化,单丹磺酰戊二胺(MDC)染色观察细胞内自噬空泡的变化。结果大鼠基底节注射凝血酶后,免疫荧光双染显示beclin1+细胞主要为星形细胞;电镜显示,自噬空泡均位于星形细胞内,未能在神经细胞中发现。离体实验表明,凝血酶可以明显上调星形细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,增加MDC染色标记的自噬空泡数量,神经细胞未见类似改变。结论脑出血后凝血酶诱导的细胞自噬主要发生于星形细胞,而不是神经细胞。
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