【摘 要】
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目的本实验通过HPLC-MS/MS测定小鼠肝脏中16种胆汁酸浓度,从而运用胆汁酸代谢网络分析异甘草素(isoliquiritigenin,Iso)在氧化/化学应激防御通路Nrf2/ARE中的保肝作用。方法
【机 构】
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中南大学湘雅二医院药学部中南大学临床药学研究所,湖南中医药大学药学院,中南大学湘雅医院药学部,
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目的本实验通过HPLC-MS/MS测定小鼠肝脏中16种胆汁酸浓度,从而运用胆汁酸代谢网络分析异甘草素(isoliquiritigenin,Iso)在氧化/化学应激防御通路Nrf2/ARE中的保肝作用。方法课题组前期通过荧光素酶报告基因法筛选甘草提取物中Nrf2/ARE信号靶向分子的实验,发现异甘草素显著激活了Nrf2驱动的报告基因表达,可以用于氧化/化学应激防御通路Nrf2/ARE的肝脏保护研究。使用SIMPCA-P软件对肝脏中胆汁酸含量测定结果进行主成分分析、偏最小二乘法-判别分析。结果野生型小鼠组(Nrf2+/+)、Nrf2基因敲除小鼠组(Nrf2-/-)、异甘草素干预的野生型小鼠组(Iso Nrf2+/+)均与异甘草素干预的Nrf2基因敲除小鼠组(Iso Nrf2-/-)区分明显,且(Iso Nrf2-/-)组间较分散,提示Iso通过Nrf2/ARE通路产生抗氧化应激产物,促使体内胆汁酸外排,降低肝细胞和血液中胆汁酸水平,从而保护肝脏。再运用SPSS19.0统计学软件以Hotelling T2检验方法分析数据,结果显示,4组相互比较间有统计学意义的胆汁酸为:熊去氧胆酸(UDCA)、鹅去氧胆酸(CDCA)、胆酸(CA)、牛磺脱氧胆酸(TDCA)、去氧胆酸(DCA)、牛磺胆酸(TCA),表明这6个胆汁酸可作为评价Iso诱导Nrf2后产生保护肝脏作用的生物标识物。结论本实验为进一步深入探讨甘草保肝作用及解毒机制提供了参考。
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