光照对人视网膜色素上皮细胞趋化因子受体3配体的影响

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目的 观察光照后人视网膜色素上皮(RPE)细胞趋化因子受体3(CCR3)配体嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)-1、eotaxin-2、eotaxin-3的表达.方法 体外培养人RPE细胞,取第5~10代生长状态良好的传代细胞用于实验.将同代细胞随机分为光照干预组与正常对照组.采用15 W蓝色荧光灯自制光照器,以(600± 100) Lux的强度对光照干预组细胞持续光照12 h,对照组细胞采用双层高压消毒锡纸包裹.随后两组细胞均置于恒温培养箱内继续培养,并于光照结束后0、3、6、12、24 h终止细胞培养.采用实时聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法分别检测eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3 mRNA和蛋白的表达.结果 光照干预组细胞eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3 mRNA和蛋白表达均随培养时间延长呈上升趋势,其中eotaxin-3 mRNA和蛋白表达增加最为明显.光照干预组与正常对照组比较,光照结束后0(t1=6.05,t2=12.561)、3(t1=2.95,t2=3.67)h时eotaxin-1、eotaxin-2 mRNA表达间差异均有统计学意义(P<0.05),eotaxin-3 mRNA表达间差异无统计学意义(t3 =1.57、1.00,P>0.05);光照结束后6(t1 =4.73,t2=18.64,t3 =28.48)、12(t1=3.11,t2=20.62,t3=18.50)、24(t1=8.25,t2=38.27,t3=18.60)h时eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3 mRNA表达间差异均有统计学意义(P<0.05).光照干预组与正常对照组比较,除光照结束后3h时eotaxin-3蛋白表达间差异无统计学意义外(t3=1.28,P>0.05);光照结束后0(t1=4.85,t2 =5.45,t3 =6.21)、3 h(t1 =5.64,t2=4.55)、6(t1 =31.60,t2 =6.63,t3 =7.15)、12(t1=14.09,t2 =18.22,t3=15.76)、24(t1 =6.96,t2 =10.47,t3=12.85)h时eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3蛋白表达间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 光照后人RPE细胞CCR3配体eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3 mRNA和蛋白表达均随培养时间延长呈上升趋势,以eotaxin-3表达增加最为突出.
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