热休克蛋白质DnaK的纯化及其二聚体性质研究

来源 :天津科技大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：woaiwodeqq

【摘要】

：

通过定点突变技术构建了两个DnaK 蛋白质突变体,研究腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）和腺苷二磷酸（ADP）条件对热休克蛋白质DnaK 二聚体性质的影响.首先诱导表达DnaK 蛋白质的两个突变体Dna

【作者】

：

刘清岱苏家跃田雪利杨营赵飞盛长忠

【机构】

：

天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津天隆种业科技有限公司,丹娜（天津）生物科技有限公司

【出处】

：

天津科技大学学报

【发表日期】

：

2016年3期

【关键词】

：

DNAK ATP 二聚体突变体 DnaK ATP dimer mutant

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（31571029）,天津市应用基础与前沿技术研究计划资助项目（15JCYBJC30300,15JCQNJC46300,15JCTPJC55400）

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通过定点突变技术构建了两个DnaK 蛋白质突变体,研究腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）和腺苷二磷酸（ADP）条件对热休克蛋白质DnaK 二聚体性质的影响.首先诱导表达DnaK 蛋白质的两个突变体DnaK-A303C 和DnaK-H541C,并采用硫酸镍亲和层析和阴离子交换层析对重组蛋白质进行纯化.对等量的DnaK 蛋白质进行氧化交联处理,然后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测ATP、ADP 对DnaK 二聚体的影响.研究表明DnaK 突变体在ADP 的存在下以同二聚体的形式存在,但是在ATP 条件下

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