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目的
对重组表达HPV68b L1蛋白的汉逊酵母工程菌进行高密度发酵,并对L1蛋白形成的类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)进行纯化、鉴定及免疫学效果评价。
方法HPV68b L1的酵母工程菌经过发酵,系列纯化和颗粒重构后获得VLPs抗原,对该抗原进行蛋白纯度、颗粒形态及免疫原性等检定,与铝佐剂吸附后免疫动物,利用假病毒体外中和试验评价其对HPV68b型及HPV68a型的保护效果。
结果发酵后的工程菌经过纯化和颗粒重构后,获得纯度大于95%的VLPs,电镜结果显示,其颗粒形态均一,大小与天然病毒颗粒接近。假病毒体外中和试验结果显示,HPV68b型VLPs抗原可诱导小鼠体内产生较高滴度的中和抗体,同时对HPV68a型也具有一定的交叉保护作用。
结论验证了重组HPV68b型VLPs蛋白用于疫苗生产的可行性,可作为多价HPV疫苗的组分。