【摘 要】
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目的：克隆树鼩γ干扰素（IFNγ）基因,在大肠杆菌中高效表达纯化并鉴定其免疫原性。方法：提取树鼩肺组织总RNA,经RT-PCR扩增出树鼩IFNγ基因,再克隆到原核表达载体p ET30a（＋）,构建重组
【基金项目】
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中国医学科学院医学与健康科技创新工程（重大协同创新项目）（2016-I2M-013）, 云南省重点新产品研发计划（2015BC010）
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目的：克隆树鼩γ干扰素（IFNγ）基因,在大肠杆菌中高效表达纯化并鉴定其免疫原性。方法：提取树鼩肺组织总RNA,经RT-PCR扩增出树鼩IFNγ基因,再克隆到原核表达载体p ET30a（＋）,构建重组表达质粒p ET-30a（＋）-IFNγ,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达树鼩IFNγ;经金属螯合柱复性及纯化,Western印迹和ELISA检测其免疫原性,并检测不同组织中IFNγ的分布情况。结果：构建了重组表达质粒p ET-30a（＋）-IFNγ,重组蛋白在30℃、1 mmol/
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