【摘 要】
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目的:利用慢病毒载体介导小鼠颏舌肌成肌细胞ERα基因沉默,筛选鉴定后建立ERα基因稳定下调的细胞群。方法:设计合成4组针对小鼠ERα基因的shRNA序列(ERα-321、ERα-693、ERα-9
【机 构】
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同济大学口腔医学院口腔生物医学及转化医学实验室
【基金项目】
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基金项目:国家自然科学基金项目(81271192)
论文部分内容阅读
目的:利用慢病毒载体介导小鼠颏舌肌成肌细胞ERα基因沉默,筛选鉴定后建立ERα基因稳定下调的细胞群。方法:设计合成4组针对小鼠ERα基因的shRNA序列(ERα-321、ERα-693、ERα-978、ERα-1297)及1组阴性对照序列(shNC),连接到经双酶切处理过的pGLV3/H1/GFP载体上,转染293T细胞包装产生慢病毒。用慢病毒转染体外培养的小鼠颏舌肌成肌细胞,流式细胞仪筛选后提取细胞RNA,RT-PCR法鉴定各组细胞中ERα的RNA干扰效果。结果:细胞转染5种慢病毒后荧光率分别为21.4
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