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目的 了解N-乙酰半胱氨酸(NAC)对心肌细胞衰老的影响及其机制.方法 将培养的SD乳鼠心肌细胞随机分为1 d组、5 d组、10 d组、1 d+NAC(1 mmol/L)组、5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组.采用流式细胞仪检测细胞周期.采用实时定量PCR与Western blot等方法检测p16INK4a、p21WAF1及Rb基因mRNA与蛋白水平表达的变化.采用β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性的改变.结果 5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组G0/G1期细胞数分别为86.71％、91.23％,显著高于单纯5 d组、10 d组的82.13％、87.97％,P均＜0.01.5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组p16INK4a基因mRNA拷贝数与β-actin比值分别为0.48、1.31,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.35、0.74,P＜0.05与＜0.01.p16INK4a基因蛋白表达与B-actin比值分别为0.96、1.12,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.31、0.49,P均＜0.01.5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组p21WAF1基因mRNA拷贝数与β-actin比值分别为1.25、2.13,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.96、1.24,P＜0.05与＜0.01.p21WAF1基因蛋白表达与β-actin比值分别为1.22、2.16,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.71、1.13,P均＜0.01.5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组Rb基因mRNA拷贝数与β-actin比值分别为0.18、0.09,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.35、0.17,P均＜0.01.Rb基因蛋白表达与β-actin比值分别为0.84、0.33,显著低于单纯5 d组、10 d组的1.47、0.81,P＜0.05与＜0.01.5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组β-半乳糖苷酶活性分别为29.71％、79.31％,显著高于单纯5 d组、10 d组的17.46％、58.24％,P均＜0.05.结论 NAC可通过增加p16INK4a与p21WAF1基因表达,抑制Rb蛋白的磷酸化,从而促使心肌细胞周期阻滞于G0/G1期,β-半乳糖苷酶活性明显增强,加重细胞衰老.