【摘 要】
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目的:建立小鼠气道和肺泡部位原代成纤维细胞的分离、培养方法,为研究肺内成纤维细胞的区域性差异提供技术平台。方法:将小鼠双肺取出并固定后,在体视显微镜视野内分别分离气
【机 构】
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复旦大学附属中山医院呼吸与危重症医学科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81470231,81670030)
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目的:建立小鼠气道和肺泡部位原代成纤维细胞的分离、培养方法,为研究肺内成纤维细胞的区域性差异提供技术平台。方法:将小鼠双肺取出并固定后,在体视显微镜视野内分别分离气道和肺泡组织块,并应用组织块培养法分别进行细胞的体外原代和传代培养。通过细胞形态观察以及细胞表面标志物的免疫荧光检测对培养的成纤维细胞进行鉴定。此外,采用阿尔玛蓝法分别检测气道和肺泡部位成纤维细胞的增殖情况并进行比较。结果:12 h内可见分离的原代细胞贴壁生长,7 d可进行传代。在倒置显微镜下观察,细胞呈长梭状,胞体丰满,胞质均匀,符合成纤维细
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