人HNF1α真核表达载体的构建及表达

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目的 构建人肝细胞核因子-1α(hepatocyte nuclear factor1α,HNF1α)真核表达载体,在体外表达并检测。方法 提取HepG2总RNA,用RT-PCR方法制备HNF1α cDNA,进行T-A克隆。HindⅢ/EcoRⅠ双酶切测序正确的重组质粒,回收HNF1α cDNA片段,将其亚克隆于pcDNA3.1(+)载体的多克隆位点内。将构建好的真核表达质粒用脂质体法转染HepG2细胞,RT-PCR和免疫印迹法检测HNF1α的表达。结果 正确构建了pcDNA3.1(+)-HNF1α重组载体
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