【摘 要】
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目的 建立体外活化外周血单个核细胞(PBMCs)中B淋巴细胞扩增和分化浆细胞的方法,为高亲和力治疗性人源单克隆抗体的研发提供研究基础.方法 从3名接种过流感疫苗健康志愿者(＞10个月)的末梢血中分离PBMCs,加入TLR9激动剂CpG DNA 2006和细胞因子等培养；流式细胞分析、酶联免疫吸附试验(ELISA)、酶联免疫斑点试验(ELISPOT)、细胞计数法评价B淋巴细胞体外活化效果.结果 与对
【机 构】
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150081,哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室,150081,哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室,150081,哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室,150081,哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室,
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目的 建立体外活化外周血单个核细胞(PBMCs)中B淋巴细胞扩增和分化浆细胞的方法,为高亲和力治疗性人源单克隆抗体的研发提供研究基础.方法 从3名接种过流感疫苗健康志愿者(＞10个月)的末梢血中分离PBMCs,加入TLR9激动剂CpG DNA 2006和细胞因子等培养；流式细胞分析、酶联免疫吸附试验(ELISA)、酶联免疫斑点试验(ELISPOT)、细胞计数法评价B淋巴细胞体外活化效果.结果 与对照组相比,刺激组中CD19阳性细胞和CD138阳性细胞的比率明显增高(t=2.625,3.571,P＜0.05)；培养上清中总lgG和抗原特异性IgG含量增加,且分泌IgG和抗原特异性IgG的浆细胞数量明显增加(t=2.942,3.196,P＜0.05),刺激组比未刺激组细胞生存率提高(t=2.182,P＜0.05).通过体外活化方法,只需约10 ml外周血即可检测到足量的抗原特异性抗体分泌细胞.结论 本试验所建立的体外活化方法能够有效地诱导外周血B淋巴细胞扩增和分化浆细胞。
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