【摘 要】
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目的快速构建哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库。方法分离外周血淋巴细胞（PBMC）,提取PBMC的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区（VH）和全长Kappa型轻链（LCκ）基因库,
【机 构】
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南方医科大学药学院,南方医科大学基因工程研究所,南方医科大学南方医院,纽约血液中心LFK研究所,广州医学院第二附属医院,香港Dgen生物技术有限公司
【基金项目】
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香港Dgen Biotech Ltd科研基金, 南方医科大学杰青培育基金~~
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目的快速构建哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库。方法分离外周血淋巴细胞（PBMC）,提取PBMC的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区（VH）和全长Kappa型轻链（LCκ）基因库,分别插入载体pDGB-HC-TM,化学转化感受态大肠杆菌DH5α,构建抗体的轻、重链基因库,然后将其联合转染CHO细胞,流式细胞仪分析全长人源抗体在CHO细胞表面的表达。结果构建的非特异性IgG1-Kappa抗体基因库,重链库容量达2.6×105,轻链库容量达2.0×105,理论库容量高达
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