人基质蛋白酶2(MMP-2)血红素结合蛋白样结构域原核表达、复性及生物学活性验证

来源 :西北农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangzuyuan
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用RT—PCR从人神经胶质瘤U87细胞扩增人基质金属蛋白酶一2(MMP-2)血红素结合蛋白样结构域(PEX)基因,克隆到pMD18一T载体然后测序;将PEX定向克隆到PET一25b(+)中构建原核表达载体PET—PEX,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达产生表达量近40%的包涵体蛋白,表达蛋白分子量大小约28.0KD,与预期大小相符。包涵体经优化洗涤,8mol/L尿素变性,采用透析法进行复性。鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验显示复性后的PEX蛋白能显著抑制鸡胚新生血管生成(P〈0.05),并且其抑制作用
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