【摘 要】
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将p72基因克隆到载体pFast Bac/ NT-TOPO上,转化大肠埃希菌DH5α.将获得的重组载体pFastBac/NT-TOPO-p72,转化大肠埃希菌DH10 Bac,获得重组杆状病毒质粒bacmid-p72.通过脂质
【机 构】
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深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,暨南大学广东省分子免疫与抗体工程重点实验室
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将p72基因克隆到载体pFast Bac/ NT-TOPO上,转化大肠埃希菌DH5α.将获得的重组载体pFastBac/NT-TOPO-p72,转化大肠埃希菌DH10 Bac,获得重组杆状病毒质粒bacmid-p72.通过脂质体介导,将bacmid-p72转染sf9细胞,获得重组杆状病毒.用重组杆状病毒感染正常生长的sf9细胞,72 h后收集细胞,超声破碎后取上清进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果显示,重组蛋白大小约78 ku,且重组蛋白可以与非洲猪瘟标准阳性血清反应.说明表达的重组蛋白为可溶性的,并具有良好的反应原性.
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