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目的
筛选丙型肝炎病毒(HCV) 1b亚型包膜蛋白编码基因,用于HCV 1b亚型假病毒制备与应用。
方法从中国同一1b型HCV感染者(366)体内不同HCV准种中筛选不同的包膜蛋白编码基因,构建表达质粒并制备HCV假病毒(HCVpp),体外感染靶细胞,与前期制备的HCV 1b参考株HCVpp平行比较感染效率,并将HCVpp应用于中和抗体检测。
结果从中国同一1b型HCV感染者(366)体内筛选获得的包膜蛋白编码基因可制备感染效率明显不同(分高/中/低3种类型)的HCVpp,确定了其中一个HCV包膜蛋白基因(366-C)可制备出高感染效率的HCV 1b型假病毒,并应用于HCV特异性中和抗体检测。进一步研究表明366患者不同准种来源包膜蛋白表达水平相近,但序列分析发现感染效率不同的包膜蛋白存在个别氨基酸差异。
结论本研究获得了高感染效率的HCV 1b型假病毒,为HCV研究及疫苗与药物研发提供了有效工具。