内皮素1串联体的构建及其在COS-7细胞中的表达鉴定

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目的:克隆、表达内皮素1(endothlin1,ET1)串联体,提高ET1的免疫原性及其免疫机体后产生抗体的效价。方法:通过pGEX-4T-1载体对ET1的基因进行了串联,并在ET1串联基因下游引人GM-CSF基因,酶切鉴定及序列分析构建重组质粒;再将含有ET1串体与GM—CSF的融合基因连接至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,同样经过酶切鉴定及序列测定证实;并对构建表达载体转染COS-7细胞,应用间接免疫荧光法及ELISA检测表明目的基因在COS-7细胞中的表达情况。结果:正确构建了ET1重复序列4
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