目的:探究TLR5和NLRC4受体在不同乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-435中的表达和定位情况,并探讨重组鞭毛素蛋白对乳腺癌细胞TLR5受体的激活情况。方法:利用Real-time PCR法检测MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-435细胞TLR5和NLRC4 mRNA表达水平,用流式细胞仪检测MDA-MB-231、MCF-7细胞TLR5受体的表达和定位。纯化重组鞭毛素蛋白即全长鞭毛素蛋白Fli C(同时激活TLR5和NLRC4两条通路)、Fli CΔ90-97(不能激活TLR5通路)、FliCL3A(不能激活NLRC4通路)、Fli CΔ90-97:L3A(两条通路都不激活)。用1μg/ml重组鞭毛素蛋白刺激MCF-7细胞,12 h后,ELISA法检测IL-8的分泌。结果:MCF-7细胞TLR5 mRNA表达水平最高,约是MDA-MB-435细胞的1 700倍,MDA-MB-231细胞TLR5表达水平是MDA-MB-435的约200倍。TLR5在MCF-7细胞浆和胞膜上均有表达,而MDA-MB-231细胞只在胞浆中表达。激活TLR5通路的Fli C和Fli C-L3A能够刺激MCF-7细胞分泌IL-8,而不激活TLR5通路的Fli CΔ90-97和Fli CΔ90-97:L3A则不能。结论:不同乳腺癌细胞系都表达TLR5和NLRC4,但是表达部位和表达水平不同。MCF-7细胞TLR5和NLRC4表达高于其他乳腺癌细胞系。乳腺癌细胞系表面的TLR5受体可以被鞭毛素蛋白激活,为进一步探讨TLR5通路的激活在乳腺癌细胞增殖中的作用提供实验基础。