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目的探讨在离体培养条件下硫酸链霉素是否通过半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）的激活而导致大鼠耳蜗毛细胞凋亡。方法将出生后3～4d的大鼠耳蜗基底膜取出进行离体培养，培养过夜后用0.1mmol/L硫酸链霉素培养液继续培养24h。终止培养前1h应用碳氧荧光素标记的肽荧光甲基酮（carboxyfluorescein labeled peptide fluoromethyl ketone，FAM—peptide—FMK）标记的caspase-6，caspase-8，或caspase-9指示剂作用1h，然后应用异硫氰酸四甲基罗丹明（tetramethyl rhodamine iso—thiocyanate，TRITC）标记的鬼笔环肽（phalloidin）标记毛细胞的纤毛和表皮板，再应用Topro-3DNA探针对细胞核进行染色，最后在共聚焦显微镜下观察。结果1mmol/L硫酸链霉素引起的耳蜗毛细胞缺失在底回约为80%，在顶回约为20%。经链霉素作用后，耳蜗毛细胞的细胞核发生浓缩和碎裂，同时可见caspase-6，caspase-8和caspase-9阳性表达。结论硫酸链霉素可以引起离体培养的大鼠耳蜗毛细胞凋亡，上游和下游的caspase激活可能是其主要途径。