【摘 要】
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目的 基于线粒体cytochrome coxidase Ⅰ (CO Ⅰ)和16 S rRNA基因开发DNA双重条形码鉴定方法,由此验证并补充形态鉴定,以期建立一种准确、有效地鉴定地龙及混淆品原动物的方
【机 构】
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海军军医大学药学院药用植物学教研室,上海,200433
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目的 基于线粒体cytochrome coxidase Ⅰ (CO Ⅰ)和16 S rRNA基因开发DNA双重条形码鉴定方法,由此验证并补充形态鉴定,以期建立一种准确、有效地鉴定地龙及混淆品原动物的方法.方法 对收集到的66份样品依据形态特征进行初步鉴定,使用优化后的引物同时扩增CO Ⅰ和16 S rRNA序列.优化一步法双重PCR实验条件.用MEGA 5.1计算地龙及其混淆品的种内、种间遗传距离,基于K2P模型构建NJ树.结果 COⅠ和16 S rRNA双重DNA条形码鉴定与形态鉴定结合,可准确鉴别地龙及混淆品原动物.结论 形态鉴定是分子鉴定的基础,分子鉴定是形态鉴定的有力补充.二者结合可最大程度地实现地龙及其混淆品原动物的准确鉴定.DNA双重条形码鉴定方法也可为地龙药材鉴定以及其他动物药材的分子鉴定提供参考.
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