【摘 要】
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【目的】布鲁氏菌virb8蛋白是布鲁氏菌的重要毒力因子,本研究拟构建含布鲁氏菌Virb8基因的原核表达载体,利用纯化蛋白作为包被抗原,建立检测牛布鲁氏菌血清抗体的间接ELISA方
【机 构】
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山东省农业科学院奶牛研究中心,山东农业大学动物科技学院,中国兽医药品监察所
【基金项目】
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公益性行业（农业）科研专项（200903027）,国家“863”计划项目（2012AA101300）
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【目的】布鲁氏菌virb8蛋白是布鲁氏菌的重要毒力因子,本研究拟构建含布鲁氏菌Virb8基因的原核表达载体,利用纯化蛋白作为包被抗原,建立检测牛布鲁氏菌血清抗体的间接ELISA方法（iELISA）。【方法】根据GenBank中的牛型布鲁氏杆菌Virb8序列,设计一对引物,以布鲁氏菌疫苗株S2全基因组DNA为模板扩增Virb8的基因,将目的基因克隆入PEASY-T3,经测序正确后,与载体pET-32a（＋）连接,构建重组表达质粒pET-32a-Virb8,转化E.coli BL21（DE3）,诱导表达融合蛋
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