ART-PCR方法的建立及扩增低拷贝RNA的初步研究

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建立依赖反义RNA和核糖核酸酶T1(RNaseT1)的PCR方法,称为ART—PCR,用于扩增高拷贝RNA和复杂RNA样本中的低拷贝RNA。首先,设计待检低拷贝RNA的反义RNA分子,在高拷贝和复杂RNA样本中与待检低拷贝RNA退火后用RNaseT1消化,反转录后用PCR扩增。进一步,用ARPE-19细胞中低表达基因干扰素1(IFNG)作为实例,用ART—PCR和常规实时定量PCR(RT-qPCR)检测。结果显示,用ART—PCR可以很好地消除常规RT.qPCR中低拷贝RNA的PCR抑制效应。研究结果初步
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