【摘 要】
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目的 研究4型戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)开放阅读框架2(open readingframe 2,ORF2)编码的多肽二聚体特性和抗原性特征.方法 从患者血清克隆HEV ORF2基因,在大肠杆菌中表达不同长度的ORF2多肽,并表达点突变多肽,纯化后在SDS-PAGE不同条件下分析二聚体特性,同时用Westem blot分析其抗原性特征.结果 由459～607位氨基酸构
【机 构】
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210008,南京大学医学院附属鼓楼医院检验科南京大学江苏省医学分子技术重点实验室,北京大学医学部病原生物学系,210008,南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,感染科,210008,南京大学医学院附属
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目的 研究4型戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)开放阅读框架2(open readingframe 2,ORF2)编码的多肽二聚体特性和抗原性特征.方法 从患者血清克隆HEV ORF2基因,在大肠杆菌中表达不同长度的ORF2多肽,并表达点突变多肽,纯化后在SDS-PAGE不同条件下分析二聚体特性,同时用Westem blot分析其抗原性特征.结果 由459～607位氨基酸构成的ORF2多肽能形成二聚体,而在氨基端截短13个氨基酸或在羧基端截短13个氨基酸均不形成二聚体,562位天冬酰胺、595位异亮氨酸分别突变后在SDS作用下仅以单体存在.Westem blot显示,抗-HEV仅与二聚体的ORF2多肽反应,而不与单体ORF2多肽或截短肽反应.结论 4型HEV ORF2多肽形成二聚体必须含有459～607位氨基酸,其中562位和595位氨基酸突变能影响二聚体的稳定性.该多肽的抗原性取决于二聚体结构。
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