【摘 要】
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目的明确gp42蛋白为分化抗原,检测它在人免疫细胞的表达. 方法用gp42蛋白免疫小鼠,制备抗gp42蛋白的单抗.用反义技术制备gp42蛋白表达抑制的3D5细胞.用免疫荧光染色和Western印迹确定gp42单抗的特异性.用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定gp42蛋白为分化抗原.用双色免疫荧光染色流式细胞术检测gp42分化抗原在多种人免疫细胞的表达. 结果制备了抗gp42蛋白的特异性单抗.用gp4
【机 构】
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100005,北京,中国医学科学院基础医学研究所,中国协和医科大学免疫学系,
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目的明确gp42蛋白为分化抗原,检测它在人免疫细胞的表达. 方法用gp42蛋白免疫小鼠,制备抗gp42蛋白的单抗.用反义技术制备gp42蛋白表达抑制的3D5细胞.用免疫荧光染色和Western印迹确定gp42单抗的特异性.用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定gp42蛋白为分化抗原.用双色免疫荧光染色流式细胞术检测gp42分化抗原在多种人免疫细胞的表达. 结果制备了抗gp42蛋白的特异性单抗.用gp42单抗作探针,从3D5细胞膜免疫沉淀到相对分子质量(Mr)为42*!000的一条蛋白带,并在活3D5细胞见阳性免疫荧光染色.gp42分化抗原在人外周围血CD19+、CD14+、CD4+、CD8+和CD56+细胞的表达率分别为59.71%±11.36%、89.08%±4.87%、26.03%±9.75%、24.24%±15.29%和24.20%±15.72%,在人免疫细胞株的表达率分别为58.0%(Nalm6)、72.7%(3D5)、53.6%(BJAB)、61.0%(Daudi)、6.9%(SKW6)、6.3%(Jurkat)、5.8%(Peer)、21.3%(K562)和39.1%(U937). 结论 gp42蛋白为一个分化抗原,在人外周围血CD14+细胞的表达率最高,其次为CD19+细胞,CD4+、CD8+和CD56+细胞的表达率较低.
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