【摘 要】
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T4 DNA聚合酶(T4 DNA polymerase,T4 DP)是基因工程等相关领域中不可缺少的工具酶。为获得大量高纯度并具有生物活性的可溶性T4 DP,通过从T4噬菌体基因组中克隆出T4 dp基因,
【机 构】
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哈尔滨商业大学食品科学与工程重点实验室
【基金项目】
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哈尔滨商业大学博士科研启动基金项目(92508633)
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T4 DNA聚合酶(T4 DNA polymerase,T4 DP)是基因工程等相关领域中不可缺少的工具酶。为获得大量高纯度并具有生物活性的可溶性T4 DP,通过从T4噬菌体基因组中克隆出T4 dp基因,将其克隆到pET-22b(+)质粒中构建重组表达载体pET-22b(+)-T4 dp,经DNA测序检测成功后,转化到大肠杆菌Transetta(DE3)中进行自诱导表达,通过磁珠法高效准确检测T4 DP的可溶性表达情况,并对自诱导的温度和时间进行优化,确定最佳诱导条件为30℃诱导培养10 h,分别利用超声
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