一氧化氮合酶在结肠癌中的表达及其相关功能的初步分析

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目的分析3种一氧化氮合酶(NOS)亚型在结肠癌中的表达差异,探讨神经元型一氧化氮合酶(n NOS)对结肠癌细胞增殖和迁移功能的影响。方法利用流式细胞术、Western blot、免疫荧光、组化等技术,对6株结肠癌细胞(SW480,SW620,RKO,LOVO,HT29,M5)和10例组织样本中NOS的表达进行分析。而后分别以NOS抑制剂干预NOS的功能活性,分析NOS对结肠癌细胞功能的影响。结果 3种NOS在结肠癌细胞和结肠癌组织中均有表达,以胞浆表达为主,部分核表达。流式细胞术和Western blot定量显示n NOS在所有样本中表达最强(分别为239±4.7~693.3±38.0和0.263±0.05~0.696±0.098),诱导型一氧化氮合酶(i NOS)居中(分别为42.7±13.6~236±34.0和0.079±0.04~0.291±0.006),内皮型一氧化氮合酶(e NOS)微弱或不表达(分别为13±7.4~68±13.6和0.019±0.004~0.123±0.004)。增殖和迁移功能实验显示,同时抑制3种NOS亚型或选择性抑制n NOS,可显著下调结肠癌细胞株的增殖和迁移功能(与对照组比较,抑制增殖迁移能力中位百分数为42.5%,P<0.05),而选择性抑制i NOS效果微弱(仅抑制9.7%中位百分数的增殖迁移能力,P>0.05)。结论n NOS对结肠癌增殖和迁移起着重要作用,针对n NOS表达干预治疗可能成为将来结肠癌临床治疗的手段之一。
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