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为建立简便快速检测H9及N2亚型禽流感病毒（AIV ）的方法，根据AIV H9和N2基因序列，分别设计了2对针对H9亚型AIV的HA基因和N2亚型AIV的NA基因的引物，建立了 H9亚型和N2亚型AIV双重RT‐PCR检测方法。对H9N2亚型AIV的RNA模板进行RT‐PCR扩增，可得到545 bp H9基因条带和341 bp N2基因的特异性条带；对非H9亚型的N2亚型AIV进行扩增，则仅出现1个特异性扩增条带，即341 bp N2基因条带；对非H9或N2亚型AIV和其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增，结果均为阴性；结果表明该双重RT‐PCR最低能检出100 fg H9N2亚型AIV的cDNA模板。