【摘 要】
：
目的:制备兔抗人唾液酸转运蛋白(sialin)的抗体,并进行特性鉴定。方法:应用RT-PCR从培养的人颌下腺细胞系HSG中扩增编码sialinN端1~38氨基酸的DNA序列,构建重组表达质粒pGEX-
【机 构】
：
首都医科大学口腔医学院基因治疗分子生物学实验室; 军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室; 美国国立卫生院国立牙颅颌研究所; 首都医科大学口腔医学院基因治疗分子生
【基金项目】
：
国家自然科学基金重点项目资助(30430690)
论文部分内容阅读
目的:制备兔抗人唾液酸转运蛋白(sialin)的抗体,并进行特性鉴定。方法:应用RT-PCR从培养的人颌下腺细胞系HSG中扩增编码sialinN端1~38氨基酸的DNA序列,构建重组表达质粒pGEX-5X-1-sialin,测序鉴定后,转化大肠杆菌JM109,在0.1mmol/LIPTG的诱导下表达GST-sialin融合蛋白。经SDS-PAGE鉴定后,利用GSTrapFFTM柱纯化融合蛋白,并以其免疫家兔制备抗人sialin抗体。用ELISA法测定兔抗sialin血清的效价;用Westernblot及免疫细胞化学等方法鉴定抗血清的特异性。结果:构建了重组表达质粒pGEX-5X-1-sialin;以其转化大肠杆菌在IPTG诱导下,获得以可溶性形式表达的GST-sialin融合蛋白;表达的GST-sialin经GSTrapFFTM柱纯化后,免疫家兔制备出抗sialin抗血清,ELISA法测定抗血清的效价为1∶32000。Westernblot鉴定表明,制备的抗sialin抗体可特异地识别HSG细胞中相对分子质量(Mr)约55000的sialin蛋白。免疫细胞化学检测表明,sialin抗血清识别的抗原定位于HSG细胞的细胞质和胞核。结论:成功地制备出兔抗人sialin抗血清,为进一步研究sia-lin在涎腺组织的功能奠定了基础。
其他文献
斑疹是温病学表现于体表的一项重要体征,斑疹的辨别是常用的诊法之一。温病学的斑疹与现代皮肤病学的斑疹不可简单地等同起来,临床运用时需要在明确诊断的前提下,结合中医的
网络创业是大学生创业的最广泛渠道,也是最贴近浙江省经济发展方向的创业形式。本文深入分析大学生创业者创业决策风险行为的各影响因素。通过实地调研数据,探讨风险倾向和风
目的:观察分层缝合结合海桐皮汤熏洗治疗闭合性跟腱断裂的临床疗效。方法:将62例闭合性跟腱断裂患者随机分为治疗组和对照组各31例。治疗组采用分层缝合方法修复断裂的跟腱,
日本与韩国的现代设计经历了半个多世纪的发展,从模仿到兴盛,直至形成自己独特的设计特色,得益于两国独特的历史文化背景,其设计在保持鲜明的民族特性的同时,充满现代感,但也
园林建筑是建造在园林中供人观赏和游憩的建筑场所，有亭、台、楼、阁、小桥、曲廊、花池、围墙等等，在构成园林号现中起到重要作用。由于园林建筑的形式多样，色彩丰富，使得建筑本
汽轮机是电厂机组安全、经济运行中最重要的设备之一，汽轮机正确维修与否决定热电厂经济效益好坏。安全生产是发电企业的头等大事，只有不断地从发生的事故中总结经验，吸取教训，分
通过国标方法测定香豆的主要营养成分,并与普通大豆进行比较分析。结果表明:香豆的蛋白质、脂肪含量较普通大豆低,碳水化合物含量较大豆高,氨基酸、钙、铁、磷含量也与大豆有
电作为一种特殊产品，在生产与生活中得以广泛应用。但是由于个人用电缴费意识不强、企业拖欠高额电费等情况的出现，导致供电企业面临电费收缴风险，是其不容忽视的问题。
<正>1前言食用植物油的加工工艺分为压榨法与浸出法。浸出法因具有粕饼中含残油少、出油率高、加工成本低、经济效益高等优点,被国内外植物油生产厂家广泛采用。然而,植物油