结核分枝杆菌ACR蛋白的原核表达及纯化

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：q569293407

【摘要】

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为获得区别结核感染状态的血清学鉴别诊断试剂的抗原，根据GenBank中登录的结核杆菌H37Rv的ACR基因序列设计1对引物，以热灭活的结核杆菌H37Rv菌悬液为模板，PCR扩增得到ACR基因DNA

【作者】

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曹旭东陈创夫

【机构】

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石河子大学医学院,石河子大学动物科技学院

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2009年7期

【关键词】

：

结核分枝杆菌 ACR 原核表达 Mycobacterium tuberculosis ACR prokaryotic expression

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为获得区别结核感染状态的血清学鉴别诊断试剂的抗原，根据GenBank中登录的结核杆菌H37Rv的ACR基因序列设计1对引物，以热灭活的结核杆菌H37Rv菌悬液为模板，PCR扩增得到ACR基因DNA片段。将扩增片段克隆于pGM-T载体中，得到载体pGM—T—ACR。分别将pET32a质粒和pGM-T—ACR质粒用限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ双酶切，并将纯化的ACR基因亚克隆至pET32a中，获得重组表达质粒pET32a-ACR。将其转化E．coli BL21 IPTG诱导后，经SDS—PAGE、west

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