土木香内酯对肺癌A549细胞的抑制作用及其机制研究

来源 :中华中医药学刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lingshao2009
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目的 研究土木香内酯(alantolactone, AL)对人非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用,并对其潜在分子机制进行初步探讨。方法 分别采用不同浓度的AL作用于A549细胞,利用CCK8试剂盒检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;Western Blot检测细胞凋亡和上皮间质转化相关蛋白的表达;实时荧光定量PCR检测细胞凋亡相关基因(BCL-2、BAX)、迁移相关基因(MMP3、MMP9、MMP13)和上皮间质转化相关基因(CDH1、CDH2、Vimentin)mRNA的表达;划痕实验检测细胞迁移效率。结果 CCK8检测结果显示AL对A549细胞增殖的抑制作用具有明显剂量依赖性,24 h的IC50值为10.72μmol/L;流式检测细胞周期结果显示AL增加A549细胞G0/G1期占比,使其出现G0/G1期阻滞;流式检测细胞凋亡结果显示,A549细胞经2.5μmol/L和5.0μmol/L AL孵育后24 h凋亡率分别是10.70%和13.80%,明显高于对照组细胞凋亡率(7.55%),说明AL可诱导A549细胞发生凋亡;同时,Western Blot和实时荧光定量PCR检测结果显示AL抑制A549细胞BCL-2、CDH2及Vimentin mRNA和蛋白的表达,促进BAX和CDH1的表达;实时荧光定量PCR检测结果也显示AL抑制A549细胞MMP3、MMP9和MMP13 mRNA的表达;细胞划痕实验检测结果显示AL显著抑制A549细胞的迁移能力。结论 AL可显著抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖,其机制与促使A549细胞发生G0/G1期阻滞,诱导凋亡,抑制迁移和上皮间质转化有关。这一研究结果,为AL应用于临床肺癌综合治疗提供了实验依据。
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