【摘 要】
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观察木瓜总三萜对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导小鼠胃炎保护作用,探寻其可能作用机制.将慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)模型制作成功小鼠随机分为模型组、木瓜总三萜不同剂量(50、100 mg·kg-1)组和三联疗法组,另取未感染Hp C57BL/6J小鼠作为正常组;治疗组小鼠分别给予相应的药物,每日1次,连续4周.然后取血和胃组织进行血液中活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)、单核细胞趋化蛋白1(
【机 构】
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三峡大学医学院,湖北宜昌443002;三峡大学生物与制药学院&药食同源大健康产品开发利用宜昌市重点实验室,湖北宜昌443002;三峡大学中医临床医学院,湖北宜昌443002
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观察木瓜总三萜对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导小鼠胃炎保护作用,探寻其可能作用机制.将慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)模型制作成功小鼠随机分为模型组、木瓜总三萜不同剂量(50、100 mg·kg-1)组和三联疗法组,另取未感染Hp C57BL/6J小鼠作为正常组;治疗组小鼠分别给予相应的药物,每日1次,连续4周.然后取血和胃组织进行血液中活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、角质细胞趋化因子(keratinocyte chemokines,KC)、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18、IL-4、IL-10含量,胃组织中LDH、MPO、SOD、GSH-Px、CAT和MDA活性和含量及血液、胃组织和溶酶体中β-葡萄糖醛酸酶、β-半乳糖苷酶、组织蛋白酶B和D活性的检测,HE染色法观察胃组织形态学改变;实时定量PCR法测定胃组织中Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bad mRNA表达,Western blot法测定胃组织中TLR4、MyD88、p-IKKβ、p-IκBα、NOD样受体家族3(NOD-like receptor family 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein,ASC)、pro-caspase-1、caspase-1、硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)、pro-IL-1β、pro-IL-18、Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bad、cytochrome C、凋亡酶激活因子(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)、pro-caspase-9、pro-caspase-3、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase 1,PARP-1]、cleaved-PARP-1及胞浆和胞核中NF-κB p65蛋白表达.结果 显示,木瓜总三萜可显著抑制Hp增殖,减轻胃黏膜损伤,改善淋巴细胞浸润和腺体萎缩;降低血液、胃组织中β-葡萄糖醛酸酶、β-半乳糖苷酶、组织蛋白酶B和D活性及溶酶体细胞器胞质中β-葡萄糖醛酸酶、组织蛋白酶D的活性,升高溶酶体细胞器溶酶体中β-葡萄糖醛酸酶、组织蛋白酶D活性;降低血液中ROS、MCP-1、KC、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18和胃组织中MDA含量及MPO、LDH活性,升高血液中IL-4、IL-10含量和胃组织中SOD、CAT和GSH-Px活性;下调胃组织中TLR4、MyD88、Bax、Bad mRNA和蛋白表达,下调胃组织中p-IKKβ、p-IκBα、NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、TX-NIP、pro-IL-1β、pro-IL-18、cytochrome C、Apaf-1、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP-1和胞核中NF-κB p65蛋白表达,降低p-IKKβ/IKKβ和p-IκBα/IκBα比值;上调胃组织中Bcl-2、Bcl-xl mRNA和蛋白表达,升高Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bad比值,上调胃组织中pro-caspase-9、pro-caspase-3和胞浆中NF-κB p65蛋白表达.以上研究表明木瓜总三萜对Hp诱导小鼠CAG有显著保护作用,其机制可能与增强内源性抗氧化系统功能、抑制Hp诱导CAG小鼠氧化应激、炎症反应、纠正溶酶体功能障碍及TLR4/NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路炎性激活,进而抑制线粒体介导的细胞凋亡有关.
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