【摘 要】
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目的 分离鉴定重症手足口病患者气管插管吸出液标本的EV71病毒株.方法 将采集的标本过滤除菌接种于MA104细胞,出现细胞病变效应(CPE)后提取培养上清液中的RNA,用国家标准检测
【机 构】
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山东省医学科学院基础医学研究所山东省罕少见病重点实验室,济南,250062;济南市传染病医院传染科,济南,250021
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目的 分离鉴定重症手足口病患者气管插管吸出液标本的EV71病毒株.方法 将采集的标本过滤除菌接种于MA104细胞,出现细胞病变效应(CPE)后提取培养上清液中的RNA,用国家标准检测引物进行RT-PCR鉴定；用特异性引物进行PCR获得VP1全序列,测序后以MEGA4软件与各血清型代表株VP1序列进行分析并构建分子进化树.结果 接种标本3d后细胞出现CPE,经RT-PCR鉴定为EV71,对其VP1全序列进行测定分析后,确定其为C4亚型,并绘制了分子进化树.结论 手足口病患者下呼吸道分泌物EV71的分离鉴定,为手足口病肺损伤发病机制的研究提供了依据.
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