【摘 要】
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目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸体外对人胶质瘤U87细胞增殖、凋亡和侵袋的影响。方法人工合成的HIF-1α反义短发夹经阳离子脂质体包裹后瞬时转染人胶质瘤细胞株U87,采用Western blot法检测转染后胶质瘤细胞HIF-1α蛋白表达,证实转染成功,再采用噻唑蓝(MTF)比色法和Transwell小室体外侵袭实验检测转染后对U87细胞增殖体外侵袭能力的影响,流式细胞仪检测
【机 构】
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江苏大学附属人民医院神经外科,镇江212002,江苏大学附属人民医院神经外科,镇江212002,江苏大学附属人民医院神经外科,镇江212002,江苏大学附属人民医院神经外科,镇江212002,江苏大学
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目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸体外对人胶质瘤U87细胞增殖、凋亡和侵袋的影响。方法人工合成的HIF-1α反义短发夹经阳离子脂质体包裹后瞬时转染人胶质瘤细胞株U87,采用Western blot法检测转染后胶质瘤细胞HIF-1α蛋白表达,证实转染成功,再采用噻唑蓝(MTF)比色法和Transwell小室体外侵袭实验检测转染后对U87细胞增殖体外侵袭能力的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果转染靶向HIF-1α的短链发夹RNA的胶质瘤细胞,HIF-1α蛋白表达较空白细胞组明显降低,MTT法检测转染组、空载体组和空细胞组24h细胞的增殖率分别为5.46%、21.25%、22.32%,体外侵袭性实验表明转染组、空载体组和空细胞组细胞12h侵袭ECM的细胞数分别为(22±4)、(124±3)、(122±6);流式细胞仪检测表明转染组、空载体组和空细胞组细胞凋亡率分别为(53.35±2.80)%、(12.02±1.60)%、(10.19±3.15)%,转染组与空白细胞组及空载体组比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论封闭HIF-1α蛋白的表达,可以抑制人胶质瘤U87细胞增殖和侵袭能力,促进细胞捌亡。
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