【摘 要】
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目的:探讨藤黄树茎皮中氧杂环酮类成分莽吉柿素对人胃癌HGC-27细胞的生长抑制作用及潜在的作用机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)染色实验检测莽吉柿素对HGC-27细胞的抑制作用.采用克隆形成实验评估莽吉柿素对HGC-27细胞增殖的影响.采用Hoechst染色实验研究莽吉柿素对HGC-27细胞形态变化的影响.采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测莽吉柿素给药后与凋亡过程、Neddylation修饰途径及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关的蛋白表达水平变化.采用裸鼠移植瘤模型进行莽吉柿素裸鼠
【机 构】
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北京中医药大学 中药学院 中药现代研究中心,北京 100020
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目的:探讨藤黄树茎皮中氧杂环酮类成分莽吉柿素对人胃癌HGC-27细胞的生长抑制作用及潜在的作用机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)染色实验检测莽吉柿素对HGC-27细胞的抑制作用.采用克隆形成实验评估莽吉柿素对HGC-27细胞增殖的影响.采用Hoechst染色实验研究莽吉柿素对HGC-27细胞形态变化的影响.采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测莽吉柿素给药后与凋亡过程、Neddylation修饰途径及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关的蛋白表达水平变化.采用裸鼠移植瘤模型进行莽吉柿素裸鼠体内抗肿瘤药效研究.结果:莽吉柿素给药后能够抑制HGC-27细胞的增殖能力和细胞集落形成.与对照组比较,莽吉柿素显著上调HGC-27细胞多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)和Bax蛋白表达(P<0.001),下调抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)的表达(P<0.001),发挥促进胃癌细胞凋亡的作用.莽吉柿素给药后HGC-27细胞中 β 淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白1(APPBP1)、泛素样修饰激活酶3(UBA3)和泛素结合酶E2M(UBC12)蛋白及MAPK信号通路蛋白c-Jun、c-Jun氨基端激酶(JNK)和p38的磷酸化水平均显著下调(P<0.001).进一步的体内移植瘤动物实验结果显示,莽吉柿素给药后裸鼠肿瘤体积缩小18.7%,差异具有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,莽吉柿素组裸鼠体内与肿瘤细胞增殖相关的标志蛋白Ki67阳性细胞数明显减少,肿瘤组织中棕色细胞数量明显增加.结论:藤黄树茎皮中氧杂环酮类化学成分莽吉柿素在HGC-27细胞和裸鼠上均显示良好的抗胃癌活性,其作用机制可能与抑制Neddylation修饰途径以及抑制MAPK信号通路相关.
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