TGF-β1基因特异性shRNA真核表达载体的构建及其基因抑制作用

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目的:构建针对人TGF-β1基因的shRNA表达载体并评价其在人脐静脉内皮细胞株中对TGF-β1基因的抑制作用,筛选出高效的表达载体以用于后续的RNAi研究。方法:利用生物信息学方法设计shRNA,在人TGF-β1基因的mRNA序列中选择靶序列,设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至PGenesil-1质粒。构建2个表达载体PGenesil~TGF—β1-1(pT11)和PGenesil—TGF—β1-2(pT12),酶切及测序证实后转染至人脐静脉内皮细胞株(ECV304
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