破伤风毒素C片段的基因克隆,重组表达及免疫原性

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：livos

【摘要】

：

应用ＰＣＲ直接从破伤包杆菌质粒ＤＮＡ中扩增出１．４Ｋｄ的破伤风毒素Ｃ片段基因，经ＤＮＡ序列测定证明其来破伤风片段Ｃ基因，将此基因克隆人大肠杆菌谷胱甘肽－Ｓ－锘转移酶融合表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－２，构建成重组表达质粒ｐＧＥＸ－ＴＣ。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白

【作者】

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黄诚吴文鹃王家彩周海涛饶惠宋红李忠明郭盛淇

【机构】

：

卫生部上海生物制品研究所,美国食品及药物管理局生物制品评估和研究中心

【出处】

：

中国生物制品学杂志

【发表日期】

：

1999年3期

【关键词】

：

破伤风毒素片段C 重组表达融合蛋白免疫原性 Tetanus toxin Expression Fusion protein Immunogenicity

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应用ＰＣＲ直接从破伤包杆菌质粒ＤＮＡ中扩增出１．４Ｋｄ的破伤风毒素Ｃ片段基因，经ＤＮＡ序列测定证明其来破伤风片段Ｃ基因，将此基因克隆人大肠杆菌谷胱甘肽－Ｓ－锘转移酶融合表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－２，构建成重组表达质粒ｐＧＥＸ－ＴＣ。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白电冰鉴定，表达产物为７６Ｋｄ的特异性重组蛋白。免疫印迹实验证实，重组蛋白抗原是破伤风Ｃ片段抗原。动物实验证明此重组抗原具有良好的免疫原性，１μｇ免疫

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