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人源抗菌肽LL-37在毕赤酵母中的高效表达及其活性检测

来源 :微生物学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：soiney

【摘 要】

：

根据GenBank CAA86115中的LL-37氨基酸序列，选择毕赤酵母偏好密码子，采用SOE方法合成了人源抗菌肽LL-37基因。所合成的LL-37基因全长为141bp，并在其N端引入kex2裂解位点，以保证表

【作 者】

：

申艳敏 魏建超 尚书文 牛明福 周玉珍 周斌 曹瑞兵 陈溥言 

【机 构】

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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心

【出 处】

：

微生物学通报

【发表日期】

：

2008年4期

【关键词】

：

抗菌肽LL-37 基因设计 分泌表达 活性检测 Antibacterial peptide LL-37  Genetic modification  Secre 

【基金项目】

：

教育部高校博士基金攻关项目（No.20050307023）,江苏省科技攻关项目（No.BE2006364）

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根据GenBank CAA86115中的LL-37氨基酸序列，选择毕赤酵母偏好密码子，采用SOE方法合成了人源抗菌肽LL-37基因。所合成的LL-37基因全长为141bp，并在其N端引入kex2裂解位点，以保证表达抗菌肽具有天然N端。基因克隆入pPICZα—A质粒，构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-LL-37。pPICZα-A-LL-37经Sac I酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导分泌LL-37于发酵上清液，其表达量为206mg／L。表达产物LL

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